编者按：2024年6月22日至6月26日，第32届国际血栓与止血学会（ISTH 2024）大会在泰国曼谷举办。作为血栓与止血领域最具影响力的国际盛会，ISTH大会凭借其深远的学术影响力和丰富的学术内容，吸引了全球数千名顶尖专家学者的参与。《肿瘤瞭望-血液时讯》“ISTH中国之声”专栏旨在精选并呈现中国学术界在ISTH的卓越研究成果。本期为大家呈现上海交通大学医学院附属瑞金医院王学峰教授团队李恩昊医生在ISTH大会口头报告的一项研究成果，该研究深入探索了不同血友病对FVIII 和 FIX 的免疫反应差异，以期为血液领域提供宝贵的学术参考。

对具有抑制物的HA和HB患者的 PBMC 进行单细胞测序揭示替代治疗对 FVIII 和 FIX 的不同免疫反应

研究单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院

研究作者：李恩昊  博士研究生

研究背景

约30%的重型血友病A（HA）患者在替代治疗后，会因同种免疫反应而产生FVIII抑制物。然而，只有约10%的重型血友病B（HB）在接受FIX药物治疗后，会产生针对FIX的抑制物。此外，FVIII抑制物和FIX抑制物对治疗的有效率和复发率也存在明显差异。重型HA和HB患者暴露于FVIII和FIX时免疫反应明显存在差异的机制尚未得到充分认识。

研究目的

该研究旨在探索 HA 和 HB 患者对 FVIII 和 FIX 的免疫反应差异，并揭示导致 HA 和 HB 患者产生抑制物的临床表现出现明显差异的机制。

研究方法

本研究采用单细胞测序技术，对替代治疗后产生抑制物的5名HA和5名HB患者的外周血单个核细胞（PBMC）样本进行分析。数据预处理和质量控制采用一系列R包，包括“CellRanger”、“Seurat”、“doubletfinder”和“harmony”等。随后，对细胞亚群进行了聚类分析、细胞亚群比例分析及B细胞受体（BCR）和T细胞受体（TCR）免疫组库分析。应用R软件（4.2.2版本）进行统计分析。

研究设计

研究结果

对数据进行质量控制后，根据PBMC常用的细胞标记，共将75,051个细胞（包括32,679个来自HA组的细胞和42,372个来自HB的细胞）聚类为19个亚群。HA与HB组淋巴细胞中不同类型免疫细胞的细胞比例进行t检验，结果显示携带抑制物的HB患者T细胞比例显著高于HA患者，而HA患者的B细胞比例较高。该研究结果与既往相关研究提出的观点一致，即在HA和HB患者中，免疫系统可能通过不同的途径识别并引发对外源性FVIII和FIX的同种免疫反应。静脉注射的FVIII和FIX在结构、组织分布和代谢方面的差异，可能是导致HA和HB患者在生成抑制物时表现出明显不同的免疫反应的原因。

专家简介

王学锋 教授

上海瑞金医院主任医师，博士生导师,上海交通大学医学院医学技术学院副院长, 检验系主任，附属瑞金医院实验诊断中心主任，检验科主任，临床输血科主任。

上海市领军人才、上海医学会检验分会主委、全国临床输血委员会副主任、中华医学会检验分会血液学和体液学学组副组长。

长期从事出血病及血栓病诊治的研究，对各种出血病尤其是严重的出血的诊断与治疗有较丰富的经验 。

专家简介

李恩昊   博士研究生

上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科

研究方向：出血与血栓性疾病的临床和分子发病机制研究