编者按：2024年6月22日至26日，备受期待的第32届国际血栓与止血学会（ISTH）大会在泰国曼谷举行。作为血栓与止血领域的权威性学术组织，ISTH不仅汇聚了来自世界各地的顶尖专家，更是推动了这一领域的边界不断扩展。在本届ISTH大会上，徐州医科大学血液病研究所乔建林教授口头报告了题为“Notch1信号在肝脏血小板生成素（TPO）产生中的作用”的研究（OC09.4）。《肿瘤瞭望-血液时讯》现场特邀乔建林教授分享解读该研究内容。

研究简介

背景

Notch信号在一些发育过程和细胞功能中起调节细胞命运的作用。然而，Notch在肝脏血小板生成素（TPO）产生中的作用尚不明确。

目的

我们注意到肝脏Notch1缺乏的小鼠出现了血小板减少症，因此研究了这些小鼠的TPO产生和其他血小板特征。

方法

提取RNA并进行RNA-Seq分析。分离原代肝细胞以测量JAK2-STAT3信号传导。去唾液酸化的血小板要么与原代肝细胞共培养，要么注入对照小鼠或肝细胞Notch1缺乏的小鼠体内，以评估Notch1在体外或体内调节肝脏TPO产生的作用。

结果

我们发现对照小鼠和Notch1缺乏小鼠的肝脏超微结构和肝细胞功能相当。然而，Notch1缺乏的小鼠血浆TPO和肝脏TPO mRNA水平显著降低，伴随着血小板数量减少和巨核细胞分化成熟受损，这些情况可以通过添加外源性TPO得到恢复。此外，Notch1缺乏的肝细胞中JAK2/STAT3磷酸化显著受抑制，与RNA-seq分析一致。在体外培养的Notch1缺乏的肝细胞中，经去唾液酸化血小板处理后，JAK2/STAT3磷酸化和TPO产生也受损。一致地，体内特异性敲除肝细胞Notch1抑制了经去唾液酸化血小板处理后诱导的JAK2/STAT3磷酸化和肝脏TPO产生。有趣的是，Notch1缺乏降低了HES5的表达，但未降低HES1。此外，去唾液酸化血小板促进了HES5与JAK2/STAT3的结合，导致肝细胞中JAK2/STAT3磷酸化和途径激活。肝细胞Ashwell-Morell受体（AMR）（去唾液酸糖蛋白受体1，ASGR1）与Notch1物理结合，抑制AMR损害了Notch1信号激活和肝脏TPO产生。此外，阻断去唾液酸化血小板上的Dll4抑制了肝细胞Notch1激活和HES5表达，JAK2/STAT3磷酸化以及随后的TPO产生。

结论

总之，我们的研究确定了Notch1在肝脏TPO产生中的新调节作用，表明它可能是调节TPO水平的靶点。

专家访谈

《肿瘤瞭望-血液时讯》：您的研究揭示了Notch1在调节肝脏TPO产生中的角色，请问Notch1是如何影响TPO产生的？

乔建林教授：在肝细胞中，Notch1受体在正常的生理状态下，与去唾液酸化的血小板相结合。这种结合触发了肝细胞内部Notch1信号通路的转导，进一步导致由Notch1调控的靶基因HES5的高表达。当HES5表达量增加时，它会与肝细胞内的JAK2/STAT3复合体结合，从而引发STAT3的磷酸化过程。这一系列反应参与了肝脏中TPO水平的转录、表达以及分泌的调控。

《肿瘤瞭望-血液时讯》：您的研究揭示了 Notch1可能成为调节TPO水平的潜在靶点，请问您对于未来有什么工作安排？是否探索其他分子在TPO产生中的作用？

乔建林教授：关于未来的工作方向，我们将主要聚焦于探索肝细胞Notch1受体信号通路以外的其他信号通路和分子是否也参与其中。此外，肝脏中的枯否细胞（Kupffer细胞），即肝脏内的巨噬细胞，在调控肝细胞TPO分泌过程中扮演着重要角色。因此，我们将进一步研究肝脏枯否细胞与肝细胞Notch1受体之间是否存在潜在的关联，以期更全面地理解这一过程。

《肿瘤瞭望-血液时讯》：您的研究对于我们临床工作，比如理解血小板减少性疾病或者是TPO水平异常相关疾病的发生机制有什么指导意义？

乔建林教授：我们的研究揭示了在正常生理状态下，肝细胞的Notch1受体参与调控肝细胞TPO的分泌。临床上，肝细胞TPO水平或血小板数目异常相关的疾病，可能提示肝细胞中Notch1受体的表达水平或Notch1信号通路中的关键信号分子出现了异常变化。这些异常变化最终影响了肝细胞TPO的分泌水平，导致血小板数目异常，进而参与了相关疾病的发生。

专家简介

乔建林教授，博士毕业于澳大利亚MONASH大学，师从国际著名血小板专家Robert Andrews教授。现就职于徐州医科大学血液病研究所，研究方向为血小板受体、血栓与止血。入选国家优青、入选江苏特聘教授、江苏省双创人才（卫生创新）、江苏特聘医学专家、江苏省“333高层次人才培养工程”中青年领军人才（第二层次培养对象）等。主持国家自然科学基金、教育部留学回国人员科研启动基金、人社部留学人员科技活动项目择优资助、江苏省自然科学基金等国家和省部级课题10余项。获亚太地区血栓与止血学会Travel Award、江苏省高等教育科学研究成果奖二等奖、澳大利亚血栓与止血学会（ASTH）Medal Award、徐州市优秀科技工作者等。受邀参加国际巨核细胞与血小板学术会议（GRC 2019）、全球华人血栓与止血会议（2019）、国际血栓与止血会议（ISTH 2019）和亚太地区血栓与止血大会（APSTH 2018）并作大会报告或主持。

近年来以第一或通讯作者在Blood（IF=22.113）、Immunol Rev（IF=12.988）、Redox Biol（IF=11.799）、Haematologica（IF=9.941）等国际期刊发表SCI论文40篇。现担任platelets 杂志（IF=3.9）副主编，江苏省血液学分会血栓与止血学组副组长、江苏省研究型医院学会血栓与止血专委会副主任委员、中华医学会血液学分会血栓与止血学组委员、中国生理学会血栓与止血专委会委员、中国老年医学学血液学分会血小板疾病学组委员、国际血栓与止血协会（ISTH）会员和美国血液学学会（ASH）会员。