编者按：第21届国际慢性淋巴细胞白血病研讨会（iwCLL 2025）于2025年9月12日～15日在波兰克拉科夫（Kraków）盛大召开。作为全球慢性淋巴细胞白血病（CLL）领域的顶尖学术盛会，iwCLL每两年举办一次，汇聚全球血液肿瘤领域的顶尖专家与学者，深入探讨CLL的前沿研究和治疗进展，推动学术创新与临床变革。本次大会上加州大学圣迭戈分校Thomas J. Kipps教授和Emanuela M. Ghia教授的一项研究入选口头报告（摘要号：1024），探讨了del(17p)/TP53突变CLL的生存与耐药机制及潜在治疗策略。与会现场，《肿瘤瞭望-血液时讯》特邀两位专家接受采访，详细探讨了这一机制的临床意义及其对未来个体化治疗的启示，为高危CLL患者的精准治疗提供新视角。
《肿瘤瞭望-血液时讯》在您的研究中，ROR1信号通过NRF2-NQO1-Cyclin A1通路增强了del(17p) CLL的生存能力和药物耐受性。您能否分享这一机制对临床治疗的潜在影响？特别是在应对BTKi耐药性方面，这一发现如何指导我们开发新的治疗策略？
Thomas J. Kipps 教授：我们聚焦于ROR1蛋白的作用机制研究。该蛋白在CLL细胞表面特异性表达，可作为靶向治疗的潜在标志物，同时可能作为关键信号分子，激活多种白血病细胞内信号通路。本研究深入探讨了NRF2通路等信号通路的激活机制，为CLL的分子机制研究及靶向治疗开发提供了重要理论依据。
Emanuela M. Ghia教授：本研究发现了一种与CLL相关的关键生存通路，该通路可被抗ROR1抗体靶向，其通过抑制逃避凋亡的CLL细胞，可有效应对药物耐药性。
Thomas J. Kipps 教授：我认为这对于携带17p缺失和p53突变的CLL患者尤为重要。因为相关信号通路的激活可能为CLL细胞带来生存与增殖优势，并促进进一步的遗传变异，从而形成复杂核型，并产生赋予靶向治疗耐药性的突变。
Emanuela M. Ghia教授：这些细胞实际上能够抵抗BTK抑制剂及其他通过诱导ROS发挥作用的药物。然而，令人振奋的是，如果能够去除其关键的生存信号，便可能显著增强细胞对凋亡的敏感性。这一机制或将成为应对这类即便在靶向治疗下仍难以控制的细胞的“阿喀琉斯之踵”。
Oncology Frontier-Hematology Frontier：In your study, ROR1 signaling enhances the survival and drug resistance of del(17p) CLL through the NRF2-NQO1-Cyclin A1 axis. Could you share the potential clinical implications of this mechanism? Specifically, how does this finding guide the development of new therapeutic strategies for addressing BTKi resistance?
Prof. Thomas J. Kipps：Our research focuses on the mechanistic role of the ROR1 protein. This protein is specifically expressed on the surface of CLL cells, serving as a potential biomarker for targeted therapy, while also functioning as a critical signaling molecule that activates multiple intracellular pathways in leukemia cells. This study deeply explores the activation mechanisms of pathways such as NRF2, providing significant theoretical insights for understanding the molecular mechanisms of CLL and developing targeted therapies.
Prof. Emanuela M. Ghia：Our study identified a key survival pathway associated with CLL, which can be targeted by anti-ROR1 antibodies. By suppressing CLL cells that evade apoptosis, this approach effectively addresses drug resistance.
Prof. Thomas J. Kipps：I believe this is particularly significant for CLL patients with 17p deletion and p53 mutations. The activation of related signaling pathways may confer survival and proliferative advantages to CLL cells, promoting further genetic alterations, leading to complex karyotypes and mutations that confer resistance to targeted therapies.
Prof. Emanuela M. Ghia：These cells are capable of resisting BTK inhibitors and other drugs that function through reactive oxygen species (ROS) induction. However, an exciting finding is that disrupting their critical survival signals may significantly enhance the susceptibility of these cells to apoptosis. This mechanism could serve as an "Achilles' heel" for addressing these cells, which remain challenging to treat even with targeted therapies.
《肿瘤瞭望-血液时讯》您的研究表明，ROR1的抑制能够恢复del(17p) CLL对氧化应激的敏感性，尤其是在与APR-246等ROS诱导剂联合使用时。您如何看待将ROR1抑制剂与其他治疗方法（如BTKi）联合应用的前景？是否有临床试验的计划来验证这一策略的效果？
Emanuela M. Ghia教授：我们已在Ⅱ期临床试验中评估了zilovertamab（一种抗ROR1单克隆抗体）联合伊布替尼的疗效，并观察到患者获得了持久缓解。
Thomas J. Kipps 教授：该研究结果相当引人注目。数据显示，携带17p缺失和p53突变的患者在单用BTK抑制剂（如伊布替尼、泽布替尼或阿可替尼）治疗时，其无进展生存期往往较短。然而，在接受联合治疗后，这类患者能够获得显著延长的无进展生存期。这提示联合用药在此类高危患者的治疗中具有突出的疗效。尤其是抗ROR1抗体，可能为解决CLL中长期存在的p53突变相关难题提供有效手段。
Oncology Frontier-Hematology Frontier：Your research suggests that inhibition of ROR1 can restore the sensitivity of del(17p) CLL to oxidative stress, particularly when combined with ROS-inducing agents like APR-246. How do you view the prospects of combining ROR1 inhibitors with other treatments (such as BTKi)? Are there plans for clinical trials to validate the effectiveness of this strategy?
Prof. Emanuela M. Ghia：We have evaluated the efficacy of zilovertamab, an anti-ROR1 monoclonal antibody, in combination with ibrutinib in a Phase II clinical trial, and observed sustained remission in patients.
Prof. Thomas J. Kipps：The study results are particularly striking. Data indicate that patients with 17p deletion and p53 mutations typically experience shorter progression-free survival when treated with BTK inhibitors alone, such as ibrutinib, zanubrutinib, or acalabrutinib. However, following combination therapy, these patients achieved significantly prolonged progression-free survival. This suggests that combination therapy is highly effective in treating such high-risk patients. Notably, anti-ROR1 antibodies may offer an effective approach to addressing the longstanding challenge of p53 mutation-related issues in CLL.
《肿瘤瞭望-血液时讯》您提到，在ROR1Hi del(17p) CLL患者中，Wnt5a/ROR1信号通路对突变型p53的稳定性至关重要。能否进一步探讨这一机制对CLL细胞克隆演化的影响？您认为这对未来CLL的个体化治疗提供了哪些新的视角？
Emanuela M. Ghia教授：确实，表达ROR1并携带17p缺失的CLL细胞能够在竞争中占据优势，取代其他亚克隆，因而成为需要重点关注的克隆，尤其是在耐药性出现的情况下。
Thomas J. Kipps教授：这为应对此类细胞提供了新的策略，否则这些细胞可能突破现有靶向疗法的控制。通过与其他药物联合使用，这一方法有望有效应对CLL中尚未满足的临床需求，从而显著改善患者的治疗效果。
Oncology Frontier-Hematology Frontier：You mentioned that the Wnt5a/ROR1 signaling pathway is crucial for the stability of mutant p53 in ROR1Hi del(17p) CLL patients. Could you further elaborate on how this mechanism impacts clonal evolution of CLL cells? What new perspectives do you think this provides for personalized treatment of CLL in the future?
Prof. Emanuela M. Ghia：Indeed, CLL cells expressing ROR1 and harboring 17p deletion can gain a competitive advantage, outcompeting other subclones, making them a critical clone to monitor, particularly in cases of drug resistance.
Prof. Thomas J. Kipps：This provides a new strategy for addressing such cells, which might otherwise overcome existing targeted therapies. Through combination with other drugs, this approach holds promise for effectively addressing unmet clinical needs in CLL, thereby significantly improving patient outcomes.
研究简介
1024-ROR1信号传导通过激活NRF2减轻氧化应激，增强del(17p)/TP53突变CLL的生存和耐药性
17号染色体短臂缺失（del[17p]）是慢性淋巴细胞白血病（CLL）中的一种高危基因组异常，导致TP53等位基因缺失，且在超过80%的病例中伴随保留等位基因的体细胞突变。这种TP53双重失活引发基因组不稳定性，与复杂核型（CK，≥3种染色体异常）显著相关，并增加对靶向治疗（如布Bruton酪氨酸激酶抑制剂[BTKi]）耐药的风险。对493名未经治疗CLL患者的分析显示，del(17p)和/或CK在高ROR1表达（ROR1Hi）病例中显著富集（P<0.01）。ROR1作为Wnt5a的胎儿期受体，激活促生存信号通路（ERK1/2、NF-κB、NRF2），并与CLL不良预后相关。
为探究ROR1在del(17p) CLL中的作用，我们使用MEC1细胞（一种携带单等位del(17p)和TP53框架移位突变Q317fs*29的CLL衍生细胞系，表达Wnt5a但缺乏ROR1）进行实验。通过CRISPR-Cas9技术，我们生成了WNT5A敲除（MEC1Wnt5a−/−）、TP53敲除（MEC1TP53−/−）和SQSTM1（p62）敲除（MEC1p62−/−）变体，并将ROR1转导至这些细胞系，构建了MEC1-ROR1、MEC1Wnt5a−/−-ROR1、MEC1TP53−/−-ROR1和MEC1p62−/−-ROR1细胞系。
在MEC1-ROR1细胞中，ROR1信号上调NRF2靶基因（FDR q=0.07-0.002）和细胞周期调控基因（FDR q<0.001），包括调控G1/S和G2/M转换及DNA双链断裂修复的CCNA1（cyclin A1）。与对照组（MEC1、MEC1Wnt5a−/−-ROR1）相比，MEC1-ROR1细胞中NQO1（P=0.005-0.001）、突变p53蛋白（P=0.001-0.004）、p62（P=0.004-0.002）和cyclin A1（P=0.003-0.001）水平显著升高。ROR1表达还增强了对eprenetapopt（APR-246，一种耗竭谷胱甘肽并提升活性氧[ROS]的化合物）的耐药性，而在p62缺陷细胞中此效应被消除，证实p62在NRF2激活中的作用。虽然TP53敲除在MEC1和MEC1Wnt5a−/−-ROR1细胞中增加了APR-246耐药性，但在MEC1-ROR1细胞中未见此效应，表明ROR1信号可弥补TP53缺失的影响。
在原代ROR1+ del(17p) CLL细胞中，Wnt5a上调NQO1、cyclin A1和突变p53（P≤0.02），这些效应被人源化抗ROR1抗体zilovertamab阻断。体内实验进一步验证，zilovertamab治疗显著抑制患者CLL细胞中NRF2靶基因和细胞周期基因的表达（第28天与基线相比，FDR q<0.001）。从机制上看，ROR1信号通过NRF2驱动的NQO1稳定突变p53，NQO1作为伴侣蛋白防止构象不稳定的p53突变体被蛋白酶体降解。Cyclin A1受野生型和突变型p53转录激活，促进细胞周期进程和DNA修复，使del(17p) CLL细胞能够耐受基因组应激。这一轴线形成了一个生存生态位：NRF2激活通过谷胱甘肽合成减轻ROS应激，而cyclin A1促进DNA损伤下的复制。因此，ROR1Hi del(17p) CLL细胞能够逃避APR-246的氧化应激诱导效应，而ROR1抑制可恢复其脆弱性。临床上，这一通路解释了ROR1Hi队列中del(17p)/CK的富集及其对BTKi耐药的倾向，持续的细胞周期和应激适应促进了克隆进化。
靶向ROR1的治疗破坏了这一生存网络。Zilovertamab通过阻断Wnt5a-ROR1相互作用，抑制NRF2活性，降低NQO1/cyclin A1水平，并使突变p53不稳定，从而增强细胞对ROS诱导剂（如APR-246）的敏感性。在ROR1Hi del(17p) CLL细胞中，zilovertamab逆转了Wnt5a介导的耐药性（P=0.0003），体内数据也显示治疗患者中NRF2/细胞周期通路活性降低。这些结果表明，ROR1是del(17p) CLL生物学的关键环节，连接了致癌信号（TP53突变、CK）与治疗耐药性。通过维持突变p53并在基因毒性应激下促进增殖，ROR1Hi细胞逃避凋亡并获得驱动复发的突变。
总之，ROR1信号通过NRF2-NQO1-cyclin A1轴维持del(17p) CLL的生存，稳定突变p53，促进细胞周期进程，并赋予氧化应激耐受性。这一通路解释了ROR1Hi表达、CK和不良预后的关联，而zilovertamab通过逆转这些机制成为一种潜在治疗策略。结合ROR1抑制与BTKi或ROS诱导疗法（如APR-246）可缓解高危CLL的耐药性，为靶向生存信号和基因组不稳定提供双重干预方法。
专家简介
Thomas J. Kipps 教授
加州大学圣迭戈分校Moores癌症中心
医学杰出教授、新疗法中心主任以及血液恶性肿瘤项目联合主任。先后在哈佛大学获得免疫学博士学位和医学博士学位，并在斯坦福大学完成了内科、血液学和遗传学的住院医师及专科医师培训。
现任Evelyn and Edwin Tasch癌症研究讲席教授，曾两次获得美国白血病与淋巴瘤协会（LLS）授予的白血病专项研究中心（SCOR）基金，两次获美国国立卫生研究院（NIH）颁发的MERIT奖。他还是慢性淋巴细胞白血病（CLL）研究联盟（CRC）的首席研究者，领导美国及国际顶尖研究者之间的跨机构协作研究。
他因在白血病研究领域的卓越贡献，获颁Rai/Binet奖章；并因推动血液肿瘤知识与治疗进展，获血液肿瘤学会（SOHO）授予的Michael J. Keating杰出成就奖。同时担任国际慢性淋巴细胞白血病研讨会（iwCLL）主席。iwCLL作为国际非营利学术组织，致力于推动CLL患者管理与预后改善。
Emanuela M. Ghia教授
加州大学圣迭戈分校新疗法中心
加州大学圣迭戈分校新疗法中心Thomas Kipps教授实验室的项目科学家，以及生物样本库与相关科学研究的科学总监。
Ghia博士的研究重点在于从单细胞水平解析肿瘤及其微环境，旨在揭示新的蛋白质组学与转录组学特征及关键信号通路。其总体目标是识别可靶向的癌症干性驱动因素、肿瘤细胞脆弱环节、肿瘤微环境的关键依赖性，以及不同疗法在慢性淋巴细胞白血病和乳腺癌中的作用机制。她的研究深入分析患者样本和患者来源的动物模型，并广泛应用前沿的单细胞技术。
Ghia博士在意大利罗马萨皮恩扎大学获得硕士和博士学位。因其在慢性淋巴细胞白血病免疫球蛋白基因方面的开创性研究，她获得了加州大学圣迭戈分校Moores癌症中心血液肿瘤学部颁发的血液癌症研究基金博士后奖学金。此外，她还在罗马萨皮恩扎大学完成了医学遗传学的研究生专科医师培训。